一、课程基本信息
课程编码:101E2008S
课程中文名称: 生物技术概论
课程英文名称:Biotechnology
实验学时学分数: 16学时 1学分
适用专业: 农学、农艺、种子
开课学期:第4学期
大纲执笔人: 薛金爱
大纲审核人:张莉
编写时间:2016年4月10日
二、课程性质
本课程是生物技术概论的课程实验,需要以基因克隆技术的理论内容为基础,其教学目的是为培养学生分析问题和解决问题的能力,提高学生在分子克隆操作方面的动手能力,通过实验,要求学生能在原有的相关理论知识基础上,掌握质粒DNA的提取、酶切、片段回收及重组连接、感受态细胞制备、PCR、琼脂糖凝胶电泳的关键技术。通过有限的实验室实践,涵盖分子生物学各个方面的实验内容,以点带面,突出重点,促进学生对分子生物学课程学习内容的理解和掌握。
三、实验教学目的与任务
本课程以培养学生掌握生物技术与分子生物学研究的基础实验技能为主要目标,力图最大限度地利用我校现有的实验条件,使学生通过本课程的学习和实践,接触和掌握从事生物技术研究所必要的实验手段。通过有限的实验室实践,涵盖分子生物学各个方面的实验内容,以点带面,突出重点,促进学生对分子生物学课程学习内容的理解和掌握。
四、实验课程基本要求
通过学习,要求学生能在原有的相关理论知识基础上,较全面和深入理解基因工程原理、基本掌握分子克隆技术中常用的实验方法,以求为以后的学习和科研工作打下良好和扎实的基础。
五、实验课程内容与学时分配(请不要随意变动此表的格式):
序号 |
实验项目名称
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类 型 |
学 时 |
基础 |
综合设计 |
研究创新 |
一 |
分子生物学实验室仪器介绍、试剂配制及实验室安全知识 |
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√ |
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4 |
二 |
PCR基因扩增 |
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√ |
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6 |
三 |
琼脂糖凝胶电泳检测DNA |
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√ |
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6 |
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六、实验内容及教学要求
实验一:分子生物学实验室仪器介绍、试剂配制及实验室安全知识
基本内容:分子生物学实验室仪器介绍、试剂配制及实验室安全知识。
基本要求:通过本实验了解实验室安全、试剂配制。
基本仪器设备:离心机、PCR热循环仪、琼脂糖凝胶电泳系统、凝胶成像系统等
基本耗材:吸头、离心管
实验二:PCR基因扩增
基本内容:利用PCR技术扩增基因,并用电泳检测扩增结果。
基本要求:通过本实验学习PCR反应的基本原理与实验技术。
基本仪器设备:PCR热循环仪、琼脂糖凝胶电泳系统、凝胶成像系统
基本耗材:DNA模板、4种dNTP、引物1、引物2、Taq酶、琼脂糖、DNA相对分子质量标准物、10×缓冲液(500mmol/l KCl、100mmol/l Tris·HCl、15mmol/l MgCl2、0.1% 明胶)、吸头、小指管
实验三:琼脂糖凝胶电泳检测DNA
基本内容: DNA分子在琼脂糖凝胶中电泳时有电荷效应和分子筛效应。根据不同相对分子质量的DNA片段电泳速度不一样的原理,采用琼脂糖凝胶电泳分离DNA样品。
基本要求:通过本实验学习琼脂糖凝胶电泳检测DNA的方法。
基本仪器设备:琼脂糖凝胶电泳系统、凝胶成像系统
基本耗材:三羟甲基氨基甲烷(Tris)、硼酸、乙二胺四乙酸(EDTA)、溴酚蓝、蔗糖、琼脂糖、溴化乙锭、DNA marker、检测样品、5×TBE、凝胶加样缓冲液
七、教学方式与考核要求
根据学生的实验预习、实验纪律、实验动手能力及实验报告结果,进行综合评定,最后确定实验成绩按百分制记分,实验成绩占课程成绩的20%
八、实验教材、参考书
1.《现代分子生物学实验原理与技术》,科学出版社,陈德富,陈喜文,第一版,2011
2.《分子克隆实验指南》第三版,科学出版社,萨母布鲁克(Sambrook, J.)著,黄培堂等译,2008